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Nereus LentiHERO™ | 一种提高慢病毒回收率与纯化效率的新技术


病毒载体技术的研究不断深入和发展,为遗传物质递送提供了理想的工具,成为目前
细胞治疗与基因治疗的主要递送技术。然而,研究人员在细胞基因治疗产品的纯化工艺方面却面临着重大挑战。目前的纯化工艺大都来源于为单克隆抗体开发的解决方案,不适合用于病毒载体的纯化。而基于传统树脂色谱法有明显的局限性,如回收率低、耗时且成本高。

AstreAdept™ 是一种新型的纳米纤维材料,可有效解决粒径大且脆弱的病毒颗粒纯化面临的耗时长、回收率低且杂质含量高等问题。在这里,我们展示了该技术整合到离心管形式的Nereus LentiHERO™,并将其优势带到实验室规模的病毒载体纯化中。

 

高瞬时结合表面积,更高效地处理慢病毒载体
AstreAdept™采用两种不同的电纺材料(纤维素:575nm(+/- 50 nm)和非纤维素:200nm(+/- 50 nm))交织形成特性优越的复合膜结构,可使产物溶液在高流速条件下快速扩散到高结合表面积(图1,实现无阻碍的进入孔道。将该技术整合到层析纯化基质的LentiHEROTM将慢病毒纯化带入一个新的纪元。

1.  AstreAdept™ 新型的复合纳米纤维材料解决脆弱大分子纯化的瓶颈问题

 

无阻碍液体流动系统优点:


  • 结合表面积更大
  • 高回收率
  • 高流速


 

Nereus LentiHERO™ 用于慢病毒纯化

2. Nereus LentiHERO仅需5步离心即可实现慢病毒快速纯化

 

 

Nereus LentiHERO™显著提高慢病毒回收率

高动态结合载量与高回收率,提升实验室规模慢病毒生产效率

3. 15%穿透时,每根离心柱的动态结合载量1.9E+10Nereus LentiHERO™离心柱20 mv/min的速度上样,流穿收集在10mL液体中,使用p24 ELISA分析,基于上样的总VP,计算VP穿透百分比

 

4. 有无血清培养体系慢病毒回收率:纯化后样品中慢病毒/病毒原液%

血清(-) n=3,血清(+)n=2

 

高流速条件下不影响动态结合载量

保留时间 < 1s

无血清培养体系LV回收率>60%

 

Nereus LentiHEROTM宿主细胞蛋白残留降低95%以上
降低HCP残留在实验室规模的样品生产同样重要,可显著减少非必要的免疫反应。

Nereus LentiHERO™纯化的样品

• 95% 宿主蛋白的去除

通过SDS-PAGE,洗脱液中检测不到宿主蛋白

不论培养体系中有无血清,都能显著去除宿主蛋白

5. Nereus LentiHEROTM可去除95% 以上宿主蛋白

 

Nereus LentiHEROTM对病毒结构和感染效力影响很小

Nereus LentiHERO™ 纯化后的慢病毒颗粒保持了原有的功能、形态和大小

重要结构蛋白完整,如编码了衣壳、基质与核衣壳的Gag蛋白

慢病毒颗粒大小和形态无改变

纯化后的慢病毒感染活力未降低

6. 通过WB、电镜和细胞感染实验分别对比Nereus LentiHERO™ 纯化后慢病毒结构蛋白的完整性、颗粒形状大小与感染活力均未受到显著影响。

 

Nereus LentiHEROTM兼具了产量、纯度和时间效益

一台台式离心机即可实现高通量病毒纯化

宿主细胞蛋白去除的同时样品洗脱体积减小(浓缩)

高纯度、小体积样品的进一步浓缩更节省时间

 

 

Nereus LentiHERO™ 性能总结

一种新型基于纳米纤维膜的AstreAdept™ 技术为病毒载体纯化工艺赋能

易于操作的设计,实现了功能性慢病毒颗粒的快速纯化和高回收率

能显著降低如宿主细胞蛋白(HCP)等杂质的含量

可以同时处理多个样品, 突破病毒载体开发样品制备的瓶颈

 

7. LV 纯化高得率,高通量,高纯度,适用于小体积慢病毒样本,操作时间短

 

综上所述,该技术提供了一种更具成本效益和时间效率的方案,提高研究人员对新型细胞和基因治疗项目的开发,助推新型生物治疗药物惠及广大患者。

 

产品信息*

品名

货号

规格

Nereus LentiHEROTM

NL100100

2 unit pack

*采用相同技术适用于工艺放大LentiHERO® 1LentiHERO® 10预装柱产品已上市,欢迎咨询Astrea Bioseparations代理商威尼斯欢乐娱人v3676

 

Astrea Bioseparations1987年孵化自剑桥大学,拥有超过30年层析介质研发和生产经验,是世界级层析介质产品与服务供应商。目前使用Astrea的产品已有超过21个生产工艺通过了FDAEMA的批准。Astrea在希腊语中是星际少女的意思,象征着正义、纯真、纯洁和精确。使用Astrea Bioseparations这个名字体现了我们在工作中对纯洁、精确和人性一如既往的关注。Astrea Bioseparations在全球拥有3个研发和生产基地,专注为生物大分子和CGT领域提供行业领先的层析介质和技术服务。Astrea Bioseparations推出的基于纳米纤维的新型层析技术解决了传统生物分离工载量和工艺耗时问题实现更快、更环保、更具成本效益的纯化过程,完全符合当今生物治疗创新的需求。

 

 

威尼斯欢乐娱人v3676Astrea Bioseparations品牌在中国的一级代理商,如您对上述产品感兴趣,欢迎随时拨打威尼斯欢乐娱城官网客服热线400-050-4006或登录威尼斯欢乐娱城官网官网www.xmjsci.com查询订购。

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